На жаль, організм не завжди вчасно реагує адекватною імунною відповіддю на потрапляння вірусу гепатиту С, у більшості випадків захворювання проходить приховано і хворий дізнається про свій діагноз тільки на стадії ускладнень. Пов’язано це з унікальною здатністю вірусу – мутацією. А лімфоцити, що виробляються у відповідь на запальний процес, починають працювати не тільки проти вірусу, але і клітин печінки, ніж, на жаль, посилюють положення. Тому, визначається наявність або відсутність вірусу в крові за її аналізу, одним з яких є метод ПРЦ діагностики. ПРЦ на гепатит С – це аналіз, що проводиться за принципом полімеразної ланцюгової реакції, що дозволяє визначити виробляються в організмі антитіла до провокатору захворювання. Завдяки такому дослідженню, можна поставити точний діагноз вже через 10 днів, що, неодмінно, дозволить розпочати важливе лікування своєчасно. Іншого, більш точного, способу визначення присутності вірусу гепатиту С на ранніх етапах на даний момент не існує.
Вірус гепатиту С забезпечений молекулою РНК, яка, власне, визначається через деякий час в крові хворого. Це гени вірусу. Т. к. зараження відбувається через кров, вірусу не складно з током крові опинитися в печінці і почати свою згубну діяльність. В залежності від стійкості імунітету та генотипу вірусу, визначається швидкість розвитку захворювання і його ймовірні ускладнення. 80% хворих мають справу з хронічним гепатитом, який, як правило, ускладнюється фіброзом печінки.
Необхідна ПРЦ-діагностика?
Важливість ПРЦ-дослідження полягає в самому факті діагностики. Такий аналіз дозволить з точністю дізнатися яка інфекція спровокувала захворювання, а також підібрати правильне лікування. Це особливо актуально при гепатиті, адже будь-який препарат неефективний шкідливо діє на, і без того запалену печінку.
Вперше провів дослідження Керрі Мулліс в 1983 році. До цього, дізнатися збудника хвороби можна було неможливо, так само, як і отримати зразок хвороботворного генетичного матеріалу.
Сам вірус, після відкриття аналізу, стали вивчати лише в 1989 році, тоді ж його відокремили від вірусів гепатиту А і В. Було виділено 40 різновидів гепатиту С, а також встановлено, що він здатний мутувати. Саме в цьому основна особливість і небезпека вірусу, він може пристосовуватися і виробляти антитіла, завдяки яким багато препарати, на жаль, не здатні перемогти хворобу.
Переваги ПЛР-діагностики полягають у:
- визначенні самого вірусу-збудника хвороби і виділення його виду;
- малій кількості помилок, тому даним методом досліджується ДНК вірусу;
- високої чутливості, що дозволяє виявити віруси на початкових стадіях, коли поширення ще в процесі.
Різновиди ПЛР-діагностики і розшифровка їх результатів
Медиками проводиться два види ПЛР-досліджень крові:
- якісний аналіз
- і кількісний
А також окремо варто підкреслити можливість виділення генотипу, що надійшов у кров вірусу.
Якісний аналіз
Метод якісного дослідження призначається з метою виявлення вірусу в крові, тому результат аналізу може бути тільки в двох варіаціях:
- виявлено
- чи не виявлено.
Результат «Не виявлено» є нормою. Однак можливий псевдонегативний відповідь, що пов’язано з вкрай малою кількістю вірусу в крові.
Але якщо якісний аналіз має результат «Виявлено», такий висновок вказує на наявність збудників хвороби крові прохача.
Кількісний аналіз
Кількісний аналіз ПРЦ служить для визначення концентрації вірусу в крові або, іншими словами, вірусне навантаження на організм. Аналіз дозволяє дізнатися кількість вірусів на одиницю взятої у крові хворого, визначити ступінь віремії. У свою чергу, віремія – це стан, обумовлений в медицині, коли віруси потрапили в потік крові і поширюються по всьому організму. Також результат кількісного аналізу дозволить судити про заразність хворого.
Розшифровується результат кількісного аналізу наступним чином. В результаті аналізу вказані цифри, це – кількісний показник вірусного навантаження. Для вираження концентрації вірусів використовується обчислення в МО (міжнародна одиниця) на мл, або кількість копій на мл. Найбільш часто використовується шифрування в МО. Як правило, 1 МО/мл порівнянно з 4 копіями/мл
Відповідно, за обсягом виявлених вірусів можна судити про тяжкість захворювання.
| Розшифровка цифрового позначення кількісного аналізу на гепатит С | |
| до 1,8*102 МО/мл (7,5*102 копій/мл) | значення вірусного навантаження нижче лінійного діапазону, це означає, що виконується аналіз ПРЦ не в змозі знайти потрібний ген збудника гепатиту, проте вірус в крові знайдений, але у дуже малій концентрації |
| до 4*106 МО/мл або 4000000 МО/мл (2*106 копій/мл) | низьке вірусне навантаження, значення віремії низька |
| більше 4*106 МО/мл (2*106 копій/мл) | високе значення вірусного навантаження |
| більше 2*108 МО/мл (1*108 копій/мл) | концентрація вірусного навантаження вище лінійного діапазону, значення віремії висока |
Кількісний аналіз ПРЦ може призначатися під час противірусної терапії, на різних її стадіях. Як правило, це відбувається на 1-ї,4-ї, 12-ї та 14-му тижнях. Необхідно дослідження, в даному випадку, для розуміння ефективності проведеного лікування, коли результат не виправдовує сподівань, терапію коректують і чекають наступного строку для проведення аналізу.
В залежності від вартості дослідження, воно може проводитися двома способами:
- недорогим Р-ДНК методом, який найбільш часто, власне, і використовується. Його недолік в невисокому порозі чутливості – шуканий ген виявляється від 500 МО на мл крові;
- більш дорогим ТМА способом, який дозволяє виявити під взятої крові нуклеїнові кислоти вірусних клітин. Завдяки цьому, його поріг чутливості починається від 5-ти МО на мл. Його вартість окупається в тому плані, що ТМА діагностику достатньо провести один раз, на відміну від попереднього методу, адже щоб отримати достовірний результат необхідно повторювати дослідження.
Варто взяти до уваги, що за отриманими даними дослідження неможливо визначити ступінь змін, що відбулися в печінці. Цю інформацію можуть надати лише біохімія, біопсія або еластометрія.
Генотипування вірусу гепатиту
Метод ПРЦ-дослідження крові також дозволяє визначити генотип потрапив в організм вірусу. Лікаря результат аналізу полімеразної ланцюгової реакції необхідний для підбору адекватної противірусної терапії.
Всього медицині відомо 11 генотипів гепатиту С, шифруемых цифровим кодом, і безліч субтипов під буквеної шифровкою. Найбільш важливо виявити один з п’яти генотипів вірусного гепатиту С: 1а, 1b, 2а, 2b або 3а. З них, найбільш часто виявляються є тип 1b, рідше зустрічаються 3а, 1а і 2а.
1b викликає хронізацію запального процесу в 90% випадків, перебіг захворювання даного типу ускладнене, є велика ймовірність розвитку цирозу або раку печінки. А, наприклад, 3а перетікає в хронічний гепатит в 35% випадків і розвивається зі стеатозом і вираженим ураженням жовчних каналів.
Що впливає на результат?
На жаль, помилкових результатів сучасна медицина виключити поки не в змозі. Вони можливі при:
- порушення процесу взяття крові та її транспортування в неправильних умовах;
- наявних в крові інгібітори, як хімічної, так і білкової природи;
- наявності гепарину в зразку крові.
Як підготуватися до аналізу?
Щоб результат аналізу відповідав дійсності, важливо правильно підготуватися до здачі крові. Для цього необхідно:
- здавати кров натщесерце, щоб останній прийом їжі відбувся не менше 8-ми годин назад;
- з ранку, якщо є бажання, випити тільки води, чай і, тим більше, каву пити перед аналізом можна;
- здавати кров тільки в спокої;
- за годину до того, як увійти в маніпуляційний кабінет, не курити;
- за добу до передбачуваної здачі крові не піддаватися стресам, виконувати тільки посильні фізичні дії, а також не змінювати схему живлення;
- бажано прийти до лаборанту після повноцінного сну;
- важливим правилом є здача крові до прийому ліків або ж після їх відміни витримати 10-12 днів, але, в той же час, якщо призначені хворому гормональні препарати, то їх графік прийому порушувати заборонено;
- не здавати кров після проведення рентген-обстеження і фізіотерапії.
